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O potencial papel do gene Os08g0237000 no degrane
NAYARA COSTA DE CARVALHO SOUSA OKUMOTO, Mateus Pretto, Rubens Antonio Polito, Rafaela Cinelli, MICHELANGELO MUZELL TREZZI, LEANDRO GALON, ANDRE ANDRES, Anderson Luis Nunes

Última alteração: 09-10-2019

Resumo


O objetivo deste trabalho foi relacionar o nível de expressão dos genes relacionados ao degrane com o nível de degrane das sementes. O nível de degrane foi determinado através da determinação quantitativa da resistência à tensão de ruptura na maturação fisiológica das sementes. O isolamento do RNA foi realizado dez dias após a polinização com reagente TRIZOL® a partir de 30 junções pedicelo/flor que foram polinizadas na mesma hora e dia. Os genótipos avaliados foram AV 31, AV 60 (amostra calibradora), Lacassine e Batatais. O RNA extraído foi tratado com DNase e transcrito reversamente com o kit “SuperScript™III” utilizando iniciadores polidT. As amostras de cDNA foram diluídas na proporção de 1:100 (cDNA: água destilada) e então conduzidas as amplificações através da técnica RT-PCR em tempo real. Cada amostra de cDNA foi avaliada em quadriplicata e foram usados controles positivo e negativo. Os genes avaliados foram SH4, OsCPL1, Os08g0237000, Os04g0480900, Os01g0849100, Os02g0170900. O gene constitutivo utilizado para atuar como controle endógeno na análise de expressão foi o 28S rRNA. Para análise dos dados foram colhidos valores de Ct (cycle threshold) e realizadas médias das amostras em quadriplicatas com desvio padrão inferior a 0,5 de indivíduos calibradores e indivíduos alvo para cada gene. Utilizou-se a fórmula ∆∆Ct = (Ctalvo - Ct28S) - (Ctcalibrador - Ct28S) e a aplicação do resultado em 2-(∆∆Ct) para fornecer a dimensão de variação. A resistência à tensão de ruptura dos ecótipos de arroz vermelho AV 60 e AV 31 foi de 26 e 53 gf, respectivamente. Já para as cultivares Lacassine e Batatais a resistência à tensão de ruptura foi de 102 e 159 gf, respectivamente. A expressão dos genes Os01g0849100, SH4 e Os02g0170900 foi menor para o genótipo Lacassine, 0,16, 0,26 e 0,37 vezes em relação a amostra calibradora AV 60, respectivamente. Os demais genótipos e ecótipos não apresentaram variação na expressão destes genes em relação a amostra calibradora. Já a expressão relativa do gene Os08g0237000 e OsCPL1 foi menor que 0,2 vezes em relação amostra calibradora para os genótipos Lacassine e Batatais. Já o ecótipo de arroz vermelho AV 31 não apresentou diferença na expressão do gene Os08g0237000 em relação amostra calibradora. Entretanto, o ecótipo AV 31 apresentou uma expressão relativa do gene OsCPL1 cinco vezes maior que a amostra calibradora. O gene Os04g0480900 apresentou expressão somente no genótipo Lacassine. A expressão do gene Os08g0237000 mostrou ter uma relação direta com a ausência de degrane nos materiais avaliados.


Palavras-chave


debulha natural, arroz, Oryza sativa.

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