O hormônio etinilestradiol é o mais utilizado no mundo por mulheres em contraceptivos orais, no entanto, esse não é totalmente metabolizado após o seu consumo e é excretado na sua forma original ou organicamente complexa. Estes podem ainda ser transformados em outros produtos orgânicos conjugados e acabar indo para efluentes, entrando assim em contato com peixes podendo causar diversos distúrbios. O teleósteo peixe Zebrafish (Danio rerio) é o modelo experimental cada vez mais utilizado em laboratórios de bioquímica no mundo, por apresentarem baixo custo, rápido ciclo de vida e similaridade genética com a espécie humana de até 80%. Sendo assim, um dos objetivos do projeto é a avaliação do efeito da exposição crônica ao hormônio sintético, 17-alfa-etinilestradiol, sobre os níveis do hormônio cortisol em Zebrafish e seus efeitos em longo prazo a vertebrados expostos a níveis de estrogênios ambientais. E padronizar a determinação de enzimas marcadoras dos dois sistemas em intestino e fígado, bem como padronizar análises comportamentais em larvas de Danio rerio. Foram utilizados peixes adultos ( 5 à 7 meses de idade) de ambos os sexos do tipo selvagem de Zebrafish mantidos sob fotoperíodo natural (aproximadamente 14 horas de luz e 10 horas escuro). A temperatura da água foi mantida em torno de 28ºC, com pH próximo à 7,0, o oxigênio dissolvido foi mantido numa concentração próxima de 6,8 mg/L, e o conteúdo de amônia foi mantido inferior à 0,01 mg/L. A eutanásia foi realizada conforme as Diretrizes para Prática de Eutanásia de Animais Vertebrados do CONCEA (Conselho Nacional de Controle de Experimentação Animal). A unidade experimental foram tanques/aquários de 10L e poços de microplacas para as larvas. Os animais foram divididos em 5 grupos, sendo 1 grupo controle e 4 grupos tratados sob as doses de 0,5 ng/L, 1,5 ng/L, 5ng/L, 50 ng/L e 75 ng/L,  realizando 3 repetições dos experimentos. A concentração de estrogênio será baseada no resultado da análise da água residuária. No ensaio in vivo os peixes foram mantidos em aquários de 10 L e expostos à água com diferentes concentrações de estrogênio. O período de exposição crônica compreenderá um período de 15 dias. Após a exposição os animais foram eutanasiados, e o corpo inteiro foi preparado com éter para posterior análise do hormônio cortisol, que será realizada a partir da técnica de fração lipídica. A determinação da concentração do hormônio cortisol após exposição crônica ao 17-alfa-etinilestradiol será fundamental para determinar se a exposição a xenoestrogênios pode provocar ou diminuir as respostas dos peixes ao estresse, e, consequentemente, comprometer sua sobrevivência no habitat natural. Assim, o presente estudo é fundamental para desvendar as alterações metabólicas em nível comportamental e hormonal dos peixes.